在生物制藥、精細化工與天然產物提取領域，工業級層析柱長期運行后易因樣品殘留、雜質吸附或微生物滋生導致柱效下降、背壓升高與峰形拖尾。科學、系統的清洗
工業級層析柱是恢復柱性能、延長使用壽命、保障批次間一致性的關鍵。
1、清洗前準備
關閉系統泵與閥門，卸除層析柱壓力。確認清洗溶劑與柱填料（如瓊脂糖、硅膠、聚合物）的兼容性，避免溶脹或塌陷。準備去離子水、緩沖液、再生劑與消毒液，連接清洗管路，確保流向與層析方向一致（通常為正向沖洗）。
2、初步沖洗
用5-10倍柱體積（CV）的去離子水低流速沖洗，去除鹽類、緩沖液及水溶性雜質。觀察流出液澄清度，直至電導率接近進水值。此步可有效降低后續清洗劑消耗。
3、去蛋白清洗
針對蛋白類樣品殘留，使用0.5-1MNaOH溶液循環清洗1-2小時（瓊脂糖基質耐受性強，硅膠柱禁用）。NaOH可水解蛋白質、滅活內毒素并去除脂類。流速控制在操作上限的50%以下，避免壓降突增。結束后用去離子水沖洗至中性。
4、去脂與疏水雜質清洗
對于疏水性雜質或脂類殘留，采用30-70%乙醇或異丙醇清洗2-3CV。部分系統可用含0.1-0.5%TritonX-100的緩沖液短時沖洗，增強去污力。注意有機溶劑對密封圈的溶脹影響，清洗后充分水化。
5、在位消毒（SIP）
在GMP環境中，定期執行在位消毒。常用0.5-1.0MNaOH溶液循環1小時，或200ppm次氯酸鈉沖洗30分鐘。結束后用大量去離子水沖洗至無殘留，防止氧化損傷填料。
6、再生與平衡
清洗后，用初始平衡緩沖液（如20mMPBS）沖洗5-10CV，使填料恢復離子狀態與pH環境。檢測流出液pH與電導穩定，方可重新上樣。
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